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更新时间:2022-11-16
浏览次数:2279革兰氏染色法是细菌和病毒学中密切用的一款鉴别染色法,这样的染色法法是由俩位瑞典博士汉斯·克里斯蒂安·革兰于1881年问世的。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它脱色。在革兰阴性细胞染色中,乙醇或丙 酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层和细胞质膜,结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来,当再用其他染色液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,所以红色显示不出来。在革兰阳性细胞染色中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘复合物分子太大,不能通过细胞壁,不易脱色,所以保持着紫色。
原理
革兰氏阳性菌伴随其細胞壁稍厚、肽聚糖网成次较多且化学交联高密度,故遇乙酸乙酯或二甲苯脱色治疗时,因失水就不使网孔变小,加上上它可含类脂,故乙酸乙酯治疗不可能出现了间隙,,因能够把凝结紫与碘软型物扭住滞留壁内,使其仍呈粉色;而革兰氏阴性菌故有细胞系壁薄、外膜层类脂含氧量高、肽聚糖层薄且交连度差,在遇脱色剂后,以类脂为重的外膜快降解,薄而松弛的肽聚糖网难以阻挠析出紫与碘塑料物的溶出度,如此利用酒精脱色后仍呈透明,再经沙黄等大橘红色染剂复染,就使革兰氏呈阴性菌呈大橘红色。