菌落总数质控样品使用注意事项

西林瓶菌种打管复活操作步骤
1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面进行消毒。
2、在生物安全柜中打开铝制瓶盖和胶盖。
3、用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基（《菌种说明书》中固体培养基去掉琼脂即可)于西
林瓶中将冻干菌粉全部溶解。
4、将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，可将残留在吸管中的 1-2
滴菌悬液转接至固体培养基上。
5、将液体试管和斜面试管于条件下静置培养，以液体培养结果为准。

甘油冻存管菌种打管复活操作步骤
1、准备好的菌种培养基（见《菌种说明书》）。
2、将冻存管下半部浸入 37℃温水中轻轻摇动，使冷冻状态的菌种悬液迅速融化。如果收到菌
种冻存管时菌悬液是融化状态则需要立即进行转接培养。
3、用 75%酒精棉擦拭冻存管表面进行消毒。
4、在生物安全柜中打开冻存管瓶盖，用无菌吸管吸取全部菌悬液，均匀涂布到 2 支试管斜面
或平板上。
5、将斜面试管或平板于条件下静置培养。对于生长缓慢的菌种应持续培养 2 周至更长的
时间。

注意事项
1、 所有打管操作都需要无菌操作。需由专业微生物技术人员在相应防护设备中进行，生物危
害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作。
2、 西林瓶和冻存管打开后需一次用完，不能留存。
3、 菌种经过冻干保藏后，处于休眠状态，需要转接 2-3 代恢复活力。
4、 大部分冻干菌种会在培养几天后生长。有些菌种第一代恢复生长时会有较长的延迟期，培
养此类菌种时需要将培养时间延长至正常培养时间的双倍时长，甚至 2 周至更长的时间。