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上海信帆生物:紫外分光光度法测定蛋白质含量

更新时间:2017-04-27      浏览次数:1685
考马斯亮兰G250与蛋清质切合起来,在0-1000ug/ml区间内,于光的波长595nm处的吸光度与蛋清质含磷量成比例,该用于蛋清质含磷量的测量法。考马斯亮兰G250与蛋清质切合起来较快,切合起来物质在制冷下10钟头内较稳定可靠,是一种种较高的蛋清质按量测量法办法。

1. 实验部分
1.1 仪器与试剂:
Labtech UV POWER紫外分光光度计;玻璃比色皿一套;考马斯亮蓝G250;
牛血清蛋白;超纯水。
1.2 试液的制备:
牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容。
考马斯亮兰G250试剂 称取100mg考马斯亮兰G250,溶于50ml95%的乙醇后,加入120ml85%的磷酸,用水稀释至1升。

2. 结果与讨论
2.1 校正曲线的绘制
准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml分别加入到6只10ml试管中,然后用超纯水补充到0.1ml,各试管分别加入5ml考马斯亮兰G250试剂,混合均匀后,即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度
为横坐标,吸光度为纵坐标绘制校正曲线如下图,校正曲线方程为A=0.613556C+0.001008,R=0.9994。

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