α-凝血酶(冻干粉)使用原理
α-血凝酶(α-Thrombin)也是种高特男人的丝氨酸核蛋清酶,由血凝酶原(Prothrombin,II成分)经核蛋清电离产甲烷什么而来。它在血凝步骤中起着相当关键性的角色,不只是并能推动纤维素核蛋清凝块的形成,还能提供能提供反应移动信号来启用前辅成分:V成分和VIII成分。也就可以启用XIII成分和小血板,或许当做淋巴管弯曲剂。
在体内,活化的X因子(Factor Xa)切割凝血酶原,释放出活性肽并将凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一条轻链(A chain)(Mw~6,000)和一条重链(B chain)(Mw~31,000)通过二硫键连接而成。某些情况下,α-凝血酶会发生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由对α-凝血酶A链水解并切割含有B链糖基化位点的小片段(B1,B2)组合而成。
除了用于凝血研究之外,α-凝血酶还常用来位点特异性切割融合蛋白。基因重组时将凝血酶识别位点插入在目的蛋白与利于后续纯化和/或表达的多肽或者蛋白之间,通过凝血酶切割表达的重组子即可释放目的蛋白。凝血酶本身可通过亲和层析技术快速去除。
本品是由匀质化的人凝血酶原经由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,经SDS-PAGE检测确保凝血酶原的完-全活化,并以NIH凝血酶的标准品为参考,提供的酶活力不少于3091 NIH U

。
使用方法(酶切体系)
产品溶于水,配成的1000 U/ml储存液,根据使用量分配于不同的离心管中,冻存于−20℃保存,凝血酶对不同的融合蛋白切割效率是不一样的,首先要进行小量切割试验。比如固定融合蛋白10ug,加不同量的凝血酶(如0.1U, 0.2U, 0.5U, 1U等), 在不同的温度(如4度, 16度, 室温或37度等)下进行试验。
建议摸好最佳条件后再进行扩大酶切实验
注意事项
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 本产品仅作科研用途!