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上海信帆生物告诉你:如何判断胎牛血清质量

更新时间:2014-08-21      浏览次数:2683
                                                 

     市厂上的胎牛血清类形多种多样,鱼龙相混,大多数科研业务业务者,很大是刚学习受损细胞培养教育的人,没办法识别血清品质的优缺点。据承堂经验个人总结丰富学者十几年来血清生态学化学药品和销售量的经验个人总结,个人总结如表:

一、外观
拿到血清,zui先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要

1、颜色
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。
进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量的呈现出谈黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。

2、沉淀
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生物试剂方式密切相关。
国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生物试剂会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生物试剂后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生物试剂后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。

3、澄清度
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。

二、主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:

1、内毒素
标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生物试剂一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量*,预示着已经污染。

2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。

3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。

4、pH
国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生物试剂条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生物试剂环境过程中带入,又无法过滤,很难*清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能*体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。

7、其它
不管是国产还是进口血清,都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外,抗生素的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内,抗生素的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。

三、血源
市场上的血清血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。

1、国产货血清质量水平差,这就是*的,一般主观原因并不能怪物化学药品商家的重任,还是非天然氛围差和抗生素类类的过量应用。中国大陆氛围生态破坏加重,另外繁育步骤中抗生素类类和滥用权力,有毒的害处材质会过量剩余的在血清中,zui终有不良影响于内部的植物的生长。2、南美血清,来源于有很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴拉圭等,这血清有机会采血的不可控性性,效果参差大小不一,肯定,相对而言于中国血清说好的多。此外,中国经销商的南美血清多数是色黑红,如Bioind、Gibco、Hyclone等知名品牌,但墨西哥的血清除外,这有机会和国家的采血、动物采血管艺相关联。3、中美洲血清,主要是出自美和荷兰,如Hyclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。这样血清,技能等级越高的彩色越淡,行为 为淡黄中带一定泛红,SH30070和SH30396比较就很清晰,甲级胎牛血清关键就能去干癌细胞培养教育。中美洲血清还要某个相关系数特征 是每瓶血清都能朔源,这对一个中型的肺炎疫苗厂、药厂愈加必要。4、澳州血清,收入主要的是荷兰和马来西亚,那是在美国血清禁运随后流入在我国贸易市场的,寻常不有着可追溯基本功能,基于菌物免疫试剂、车辆运输等主要原因,的价格对说相对较贵。拿Gibco的10099和16000相相对较,因此产品档次越高,茶汤颜色更淡,可玩性越高。
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