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大鼠内皮素1（ET-1）ELISA试剂盒，定量精确分析

 

使用目的：

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及重要性药液样本量中内皮素1（ET-1）纯度。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素1（ET-1）水平。用纯化的大鼠内皮素1（ET-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素1（ET-1），再与HRP标记的内皮素1（ET-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素1（ET-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素1（ET-1）浓度。

试剂盒组成

 

1	30倍溶缩干洗液	20ml×1瓶	7	终结液	6ml×1瓶
2	酶标免疫试剂	6ml×1瓶	8	规格品（400μg/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标淮品掺水液	1.5ml×1瓶
4	样品管理稀释溶液液	6ml×1瓶	10	情况使用说明	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	封严袋	一

标本要求

1．生物标本采集采摘后赶紧采取添加，添加按有关于论文资料采取，添加后肩负着快采取科学实验。若不允许刚刚采取实验室检测，可将生物标本采集放于-20℃导出，但应尽量避免间断性冻融2．不可以查测含NaN3的试样，因NaN3仰制辣根过防非金属氧化物酶的（HRP）灵活性。大鼠内皮素1（ET-1）ELISA化学试剂盒，一定量精确性分折

操作步骤

1.         规范的标准品的兑水：本实验试剂盒提拱原倍规范的标准品即使，普通用户可依据以下统计图在小试管上去兑水。 

200μg/L	5号要求品	150μl的原倍的原则品加盟150μl的原则品配制液
100μg/L	11号标准品	150μl的5号要求品加如150μl要求品配制液
50μg/L l	3号基准品	150μl的3号细则品下载150μl细则品稀释液液
25μg/L	2号规范品	150μl的3号规格品填加150μl规格品扑灭液
12.5μg/L	2号标准单位品	150μl的2号要求品申请加入150μl要求品调制液

  2.         加样：分开 设白页孔（白页相较比较孔不放土样及酶标化学制剂，另外各步进行相等）、标孔、待测土样孔。在酶标包被板上标品为准加样50μl，待测土样孔中先加土样直接调制就可以液40μl，接下来后加待测土样10μl（土样zui终直接调制就可以度为5倍）。加样将土样加于酶标板孔下面，以免不接触孔壁，轻轻地震动混匀。3.         温育：用封板膜封板内置37℃温育30多分钟。   4.         配液：将20倍沉淀洗滌液用分馏水20倍溶解稀释储备用5.         清洗：小心一点揭掉封板膜，弃去固态，甩水，每孔加注清洗液，静置秒钟后弃去，如此这般连续5次，拍干。6.         加酶：每孔参加酶标生化试剂50μl，一片空白孔排除。7.         温育：工作同3。8.         清洗：操作步骤同5。9.         显色：每孔先融入显色剂A50μl，再融入显色剂B50μl，悄悄阻尼振荡混匀，37℃避光显色1两20分钟.10.     终结：每孔加终结液50μl，终结反馈（因此蓝绿色立转成黄色）。11.     旋光度的测定方法：以空缺家用空调零，450nm主波长依序衡量各孔的吸光度（OD值）。 旋光度的测定方法应在加撤消液后1分之五钟左右采取。

操作程序总结：

 

计算

  以要求物的氧化还原电位为横地理坐标定位，OD数值纵地理坐标定位，在地理坐标定位纸中描绘出要求等值线，据土样的OD值由要求等值线知道合理的氧化还原电位；再减去溶解稀释溶液公公因数；或用要求物的氧化还原电位与OD值测算出要求等值线的垂直蜕变方程式组式，将土样的OD值代入方程式组式，测算出土样氧化还原电位，再减去溶解稀释溶液公公因数，即是土样的具体情况氧化还原电位。

注意事项

1．生化试剂盒从冷冻环境中抽出应在恒温取舍15-307分钟正后方能致用，酶标包被板打开后后如未用完，板条应装进隔绝袋中存有。2．浓洗衣液可能会会现心得挥发，扑灭时可在水浴里加温助溶，洗衣时不的影响結果。3．各步加样均时应用加样器，并常常校对其精确性性，以以免测试误差率。每次加样事件设定在两秒钟内，如组织切片用户多，个性化推荐选择排枪加样。4． 请老是测试的互相做标等值线，做复孔。如生物标本中待测材料含碳量过高（样本量OD值低于标品孔*孔的OD值），请先用样板稀释液溶解液液稀释液溶解液相应公因数（n倍）后再测试，算时请zui后乖以总稀释液溶解液公因数（×n×5）。5． 封板膜只限一遍性适用，以以免 穿插严重污染。6．底物请遮光上传。7．要严采用说书的工作采取，实验室检测最终认定必需以酶标仪读数是以.8．各种类型检样，洗衣机清洗液和各种类型丢弃物都应按传然物清理。9．本生化试剂区别批号多组分不可以混用。10. 如与用英语产品就说明怎么写书有异，以用英语产品就说明怎么写书是以。