蛋白A琼脂糖凝胶

英文翻译明称：Protein A Berpharose FF

货号：B2832

标准：1ml

1.厂品推荐

          重组蛋白A琼脂糖凝胶FF（Protein A Berpharose FF）亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质，以重组蛋白A（rProtein A）为配基，具有很高的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便，应用广泛。蛋白A（Protein A）能特异性地与抗体IgG分子的Fc区结合，所以Protein A亲和介质可用于抗体（单抗和多抗）的分离纯化，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。

2.产品规格

1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、25ml、100ml、500ml、1L 纯化具体流程

应用举例说明：

运用缓存数据液：20 mM磷酸缓存数据液，150 mM NaCl，pH 7.0

洗刷抗震液：0.1M甘-氨酸，PH3.0或0.1M青柠檬酸抗震液，pH 4.0

与降低液：1 M Tris-HCl，pH 8.5

1) 1 ml重组蛋白A琼脂糖凝胶预填柱用5-10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液。

2)用切合响应液切合响应液均衡5-10个柱床面积。

3)将5 ml人太多抗血清用构建降低液直接稀释就可以到50ml，0.45μm滤膜过滤水上样。

4)用融入缓冲区液再洗5-10个柱床体型。

5)用过柱缓解液过柱抗原，征集过柱峰，接成采和缓解液调高其pH至碱性。

6)每当选用后按顺序选用3个柱球面积的整合加载液，几个柱球面积的去铁离子水，几个柱球面积的20%的甲醇稳定性保存文档，避免 填充料被沙门氏菌污染破坏。

7) SDS-PAGE电泳定性分析。

6.注意应当应当：

1)试样洗刷后通常pH很低，应然后用偏碱性与加载液（如1MTris-HCl，pH8.5）将获得整理到的表面抗原水溶液与到碱性，或在获得整理玻璃容器中首先装5-10%、pH7.5的加载液（如1MTris-HCl或1M磷酸加载液），便于于维护表面抗原的生物体催化活性，解决表面抗原解离。

2)动用时保证质量柱子和缓冲液的高温统一，杜绝柱床内产生起泡，直接影响纯化疗效。

3)规整悬浮填料重复利用的洗涤：发生变化部分转化物质的石雕文化沉淀和蛋白质的聚合，必然出现空气流速和整合载量上升，嚴重关系纯化功能，此时应该对规整悬浮填料参与重复利用的洗涤（给出关键步骤）

消除沉淀物中或转性的物质：用2倍柱体积太大小的6M稀盐酸胍稀硫酸去洗掉，以后可以用5倍柱体积太大小的PBS, pH 7.4洗掉。

弄掉疏水溶性降解引发的非炎症因子朋友降解的物质：用3-4倍柱体型大小的70%酒精或2倍柱体型大小的1% Triton™X-100擦洗，之后之后尽快用5倍柱体型大小的PBS, pH 7.4擦洗

4)本好产品另存必备条件：20%甲醇，4~8℃。