蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶

英语名号：Protein AG-Berpharose FF

货号：B2834

外形尺寸：1ml

护肤品介紹

球蛋清A球蛋清G琼脂糖凝露FF是将并购重组球蛋清A球蛋清G融成球蛋清键合在琼脂糖凝露微球上养成的亲和分割媒介。同专门的球蛋清A或球蛋清G分割媒介对比，兼具更广阔的运用的范围，同时融成后的r-PAG消减了对pH值的依赖于，限制在pH5-8实行运用。本企业产品要多用于免疫性表面抗原积累物(IP)或是免疫性表面抗原共积累物(Co-IP)调查分析，及表面抗原不变举例它相关的调查分析。

型号规格

1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、25ml、100ml、500ml 纯化标准流程

为了避免疫共放置（Co-IP）例举：

构建缓存液：20mM磷酸缓存液、150mMNaCl、pH7.0

冲洗掉响应液：0.1M甘-氨酸，PH3.0

与缓存数据液：1 M Tris-HCl，pH 8.5

（注：所用到的过柱药液在适用以后意见用不低于少于=0.45μm滤膜滤出）

（1）合格品预操作：癌组织、蕨类植物、母乳喂奶部分动物机构裂解液合格品，之后总蛋清浓度值选定在0.5-1.0ug/ul範圍内为宜，上样时要保证 合格品水溶液成为适合自己的正离子挠度和pH值（如：会用切合实际缓解液对合格品液展开稀释溶液或透析）；母乳喂奶母乳喂奶部分动物癌组织内有多种类基本成分会和IgG突发切合实际，或许会放前续免疫检测印记中突然出现非活性聊天条带，可经过假如Normal IgG和Protein AG-Berpharose FF的行为预操作裂解液合格品，以变低非活性聊天切合实际。

（2）抗原-免疫免疫表面抗原阳性和好物准备：将免疫免疫表面抗原阳性与有效意义球蛋白的裂解液交织，温度谐振孵育30-60min（或4-8度孵育一晚），建成抗原-免疫免疫表面抗原阳性和好物（可通过已调整好的抗原免疫免疫表面抗原阳性结合起来必备条件加工）。

（要注意：抗原的入驻量要通过骨料量，抗原的入驻量过高会的影响到抗原-抗原搭配物与骨料的根据，故个人建议抗原入驻量为骨料载量的80%）

（3）生物骨料稳定平衡：取适度的Protein AG Berpharose FF下载到2ml离心式法法管上，500 r离心式法法1min，弃上清，下载0.5ml构建抗震液，漂浮生物骨料，500 r离心式法法1min，弃上清，重叠三次。

（4）抗原-表面抗原结合物的活性炭降解：将抗原-表面抗原结合物下载到平衡量好的组合填料中，不光滑，在室内温度下放置于360度旋转融合仪甚至简单手工缓缓360度旋转抽滤管，帮助试样和组合填料彻底的碰到并活性炭降解，约30min后，500 r抽滤1min，取上清液，留样加测。

（5）除杂清晰：向上述所说抽滤分离管上放入0.5ml的依照加载液，自动隐藏鲍尔环填料，对其进行清晰，500 r抽滤分离1min，吸弃上清，重新多次。

（6）抗原洗刷：

①非性质发生变化过柱法（过柱的备样实现本来的的生物学活性酶类，可于中末期功用分享）：向离心式法力式管上填加5倍柱密度的过柱缓存数据液，用移液器吹打5次，混匀，以后在高温下放至反转混合法仪一些手功轻松反转离心式法力式管10min后，500 r离心式法力式1min，汲取上清液，提取整理过柱类物质，就是指的目标抗原，提取整理上清液至新的离心式法力式管上，并可以填加十分的最为密度的中合缓存数据液中合缓存数据液调低其pH至弱酸性，采用中末期功用分享。

     ②变形冲洗掉法（冲洗掉的样品管理应代替SDS-PAGE论文检测）：向抽滤力管上填加25ul  1×SDS-PAGE Loading Buffer混后均        匀，95℃采暖器5min。第二做抽滤力，200 r抽滤力1min，采集而来上清液，做SDS-PAGE电泳，转膜后做 Western分析。

蛋白AG融合蛋白琼脂糖凝胶