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蛋白AG琼脂糖凝胶英文名称:Protein AG-Berpharose FF货号:B2836规格:5ml本产品仅供科研实验用,不做其它用途!
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零售商性:生产厂家
刷新期限:2025-10-29
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蛋白AG琼脂糖凝胶
英文音标名字:Protein AG-Berpharose FF
货号:B2836
的规格:5ml
设备解绍
淀粉酶A淀粉酶G琼脂糖凝露的作用FF是将重新组合淀粉酶A淀粉酶G相要融合淀粉酶键合在琼脂糖凝露的作用微球上演变成的亲和分割物料。同简单的淀粉酶A或淀粉酶G分割物料不同于,有着更宽阔的紧密通过标准,一并相要融合后的r-PAG调低了对pH值的依耐,同意在pH5-8对其进行紧密通过。本商品用于免疫细胞细胞石雕文化滤渣(IP)还有免疫细胞细胞共石雕文化滤渣(Co-IP)的研究方案,及免疫抗体稳固以及其它有关系的研究方案。
尺寸规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、25ml、100ml、500ml 纯化步骤流程
如不疫共石雕文化沉淀(Co-IP)为例:
通过加载液:20mM磷酸加载液、150mMNaCl、pH7.0
洗刷储存液:0.1M甘-氨酸,PH3.0
中合响应液:1 M Tris-HCl,pH 8.5
(注:食用过柱药液在食用过后意见和建议用不低于大于值为0.45μm滤膜筛选)
(1)试样英文预除理:上皮细胞系、树木、家禽组识裂解液试样英文,决定性总血清盐浓度选购在0.5-1.0ug/ul时间范围内为宜,上样前需要保证试样英文氢氧化钠溶液有了适合的的正离子效果和pH值(如:不错用依照缓冲区液对试样英文液做溶解稀释或透析);喂奶家禽上皮细胞系内有多个化学成分不错和IgG产生依照,有可能会之后续免疫细胞印记中诞生非特情人条带,可可以通过进入Normal IgG和Protein AG-Berpharose FF的手段预除理裂解液试样英文,以变低非特情人依照。
(2)抗原-抗原挽回物化学合成:将抗原与包含的需求血清的裂解液比调,空调温度之间上下孵育30-60min(或4-8度孵育隔夜),型成抗原-抗原挽回物(可通过已推广好的抗原抗原依照具体条件加工)。
(重视:表面抗原阳性的放入量要法律依据鲍尔环弹性活性炭过滤器量,表面抗原阳性的放入量不能会直接影响到抗原-表面抗原阳性混合型物与鲍尔环弹性活性炭过滤器的配合,故提议表面抗原阳性放入量为鲍尔环弹性活性炭过滤器载量的80%)
(3)生物骨料发展:取摄入足够含量的Protein AG Berpharose FF假如到2ml抽滤分离分离管上,500 r抽滤分离分离1min,弃上清,假如0.5ml融入缓存数据液,悬浮按钮生物骨料,500 r抽滤分离分离1min,弃上清,多次重复2次。
(4)抗原-免疫抗原分手后符合物的离心力分离物:将抗原-免疫抗原分手后符合物建立到稳定好的生物填料中,竖直,在室内温度下至于摆动混后仪并且手工艺品缓缓摆动离心力式管,利于打样定制和生物填料能够充分打交道并离心力分离物,约30min后,500 r离心力式1min,取上清液,留样检侧。
(5)除杂擦洗:向以上所述抽滤管内加进0.5ml的联系缓存数据液,飘浮悬浮填料,开始擦洗,500 r抽滤1min,吸弃上清,从复十次。
(6)抗原冲洗掉:
①非变形过柱法(过柱的备样提高原先的微生物活力性,可以于前期的特点进行进行分析):向抽滤管上进入5倍柱质量分数的过柱降低区液,用移液器吹打5次,混匀,那么在空调温度下居于摆动混仪还手工制作轻轻地摆动抽滤管10min后,500 r抽滤1min,吸取教训上清液,采集过柱类物质,成为方向抗原,采集上清液至新的抽滤管上,并马上进入相当中的一个质量分数的采和降低区液采和降低区液的调节其pH至比较适中,用来前期的特点进行进行分析。
②退行冲洗掉法(冲洗掉的备样于于SDS-PAGE验测):向离心法式分离分液漏斗入驻25ul 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合物均 匀,95℃加熱5min。最后做离心法式分离,200 r离心法式分离1min,分类整理上清液,做SDS-PAGE电泳,转膜后做Western分析。
蛋白AG琼脂糖凝胶
