细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。
原理：

组织冷冻熟食的机理就是尽有机会降低组织内的结晶体转变成了，减小组织内水疑固所转变成了的高氨水浓硫酸酸度溶质对组织构成的地温拉伤，从增长组织再生时的生存率。组织冻存的总数应保证质量再生时地温守护英文剂赚取1:10～1:20的掺水，掺水后的组织氨水浓硫酸酸度扔优于常见传代的组织氨水浓硫酸酸度为宜，这是是由于当地温守护英文剂掺水10～20倍的时候，该氨水浓硫酸酸度正常没对组织构成渗透性拉伤。

进行操作流程之一：

1. 配成含10%DMSO或甘油、10～20%小公牛血清的冻存塑造培养液；

2. 取多数发芽期的血细胞，除去旧培养教育液，用PBS拆洗。

3. 的还原PBS，加入到有益健康胰蛋白酶（覆盖面培養皿外面）把单面植物生长的细胞核消化酶下去；

4. 离心分离1000rpm，5min；

5. 清理胰球蛋白酶，入驻過量自制好的冻存养成液，用吸管轻柔吹打使人体细胞膜平滑，计数法，自动调节冻存液中人体细胞膜的结果是孔隙率为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将癌细胞散装入冻存管内，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标出细胞膜的分类，冻存的时间及操控者；

8. 冻存：条件的冻存源程序为减温传输速率-1～-2℃/ min；当水温达-25℃下面的时，可延长到-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可发展浸泡液氮中。也可将安装有组织细胞的冻存管植入-20℃冷柜保鲜2h ，然后呢植入-70℃冷柜保鲜中住宿，拆下冻存管，移入液氮容器设计内。

特别留意须知：

1．从增值期到达成低密度的一层体细胞核己前的陪养体细胞核都能够以使用冻存，但较好为对数生长期上皮细胞。

2．将冻存管倒入液氮器皿或从这之中取掉时，要做防火工作任务，尽量冻伤；

3．是最好的用新专门配制的教育培养液。