骨结构ALP+TRAP双重染色

产品介紹：

骨安排食用偏碱性磷酸酶（ALP）进行染色可明确成骨细胞的成骨潜能，使用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色可明确破骨细胞的骨吸收能力。通过对这两种特异性标志酶（ALP/TRAP）的同时检出，可以分析骨相关细胞的分化及骨组织的生长情况。

实验英文应用偶氮偶联法来界面显示酸碱性磷酸酶（ALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的活性，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使萘酚AS-BI磷酸酯水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色（蓝色）产物，以此证明碱性磷酸酶（ALP）的定位。在酸性条件下，酸性磷酸酶可使萘酚AS-BI磷酸酯水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色（红色）产物，以此证明抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的定位。ALP蓝色阳性信号和TRAP红色阳性信号，红蓝色对比鲜明，可清楚同时显示成骨细胞与破骨细胞的分布及含量的变化。

调查大致相同程序：

骨策划 PFA 4℃固定保存一周内（24h-48h最佳）——骨组织用我司EDTA脱钙液4℃低温脱钙——脱水浸蜡包埋石蜡切片——石蜡切片脱蜡至水——提前配制过滤的ALP染色液染色——水洗——提前配制过滤的TRAP染色液染色——烘箱烤片——中性树胶封片。

最后判读：

骨组织化沿骨膜内整齐划一布置的矮柱型成骨神经元膜呈黄色，软骨处和骨小梁边侧呈黄色，破骨神经元膜呈酒粉朱红色甚至浅粉朱红色，神经元膜核呈生态。

送样装运耍求：

1、做骨组织ALP+TRAP双重染色需要用PFA 4℃固定保存运输，固定一周内脱水包埋切片染色。室温固定数小时就会影响酶活，4℃固定超过一周也会影响酶活，导致阳性减弱甚至丢失。

2、染ALP+TRAP相互印染的骨策划 性性还要动用我公司EDTA脱钙液4℃温度过低脱钙。某个脱钙液脱钙的策划 性性，不以确保印染最终结果。用强酸脱钙液脱钙的骨策划 性性，酶灭活抗体阳性顺坏。小编建议在我公司进行骨策划 性性的全部脱钙电影制片和印染。

3、不脱钙骨安排中后期子样本制片人进行处理手段对ALP酶活影向不大，不脱钙骨安排切块和切磨片近几年不最好做此染料。